三得醫(yī)學小編為你簡單介紹幾種尿沉渣的檢驗方法。
一、尿沉渣手工制片鏡檢
直接鏡檢法
將尿液充分混勻，取其中1滴尿直接涂于載玻片上，依據(jù)各種有形成分的形態(tài)特點，用顯微鏡觀察作出報告。
玻片畫框法
用標定好的滴管加混勻尿2滴涂滿蠟筆畫好的25.2 mm×25.2 mm框內，靜止3 min后累計20個高倍視野細胞數(shù)，結果以每微升細胞數(shù)報告。細胞數(shù)/μl=T×1/20×A/B×1/V。式中T=細胞累計數(shù)，20=所觀察的視野數(shù)，A=標本分布面積，B=高倍視野面積=(高倍視野直徑/2)2.π，V=標本用量(μl)，高倍視野直徑=目鏡中光欄直徑/目鏡放大倍數(shù)，光欄直徑可用千分尺測出。
自然沉降法
將尿液在室溫下放置一定時間(15 min～30 min)后，移去上層的尿液，保留底層大約0.2 mL左右，然后混勻，取其中1滴沉淀于載玻片上，鏡檢同直接鏡檢法。
離心沉淀法
尿液10 ml離心5 min，相對離心力(RCF)為400，棄上清留沉渣尿量0.2 ml混勻，吸取20 μl，滴在玻片上用18 mm×18 mm蓋片覆蓋，先用10×10低倍鏡觀察全片，再用10×40高倍鏡仔細觀察，檢查細胞至少10個視野，檢查管型至少20個低倍視野，報告以高倍視野所見最低至最高數(shù)字表示。建議國內逐步以每微升細胞數(shù)報告。
染色法
包括濕潤染色法及特定成分染色法。
相差顯微鏡法
相差顯微鏡又稱相襯顯微鏡，是以光的衍射和干涉現(xiàn)象照射標本，產(chǎn)生明暗不同的反差識別，有助于增強透明與半透明的有形成分的輪廓，尤其是透明管型、不典型紅細胞、血小板的辨別。
干涉顯微鏡法
在不同位相時，當兩種相同顏色的光波相遇時，其亮度發(fā)生增強或減弱的變化，從而提高物體的清晰度，可觀察到細胞或管型的三維空間結構。
偏振光顯微鏡法 利用光的偏振特性對光有雙折射性的物體進行鑒別，可觀察活細胞的內含物、神經(jīng)纖維、植物纖維的結構細節(jié)和動物肌肉纖維等?？煞治鲎冃赃^程，觀察到細胞的死活：正常細胞對光偏振呈左旋，腫瘤細胞多數(shù)呈右旋，可顯示鹽類結晶在自然光下見不到的精細結構。
透射電鏡法
利用電子束作為“照明波源”可明顯提高分辨率，將尿沉渣標本切成超薄片在電子顯微鏡下觀察，可準確分辨出細菌管型、白色念珠菌管型、血小板管型、粗顆粒管型和細顆粒管型等。
二、尿沉渣定量計數(shù)板法
取一定量(10 ml)尿液置特制的離心管內，在規(guī)定離心時間和轉速的條件下離心沉淀，移去上清尿液，保留一定量的尿沉淀物，取1滴滴人計數(shù)板內，在顯微鏡下計數(shù)，然后換算成一定體積(1/μl)內尿有形成分的含量。
Li?Ucc型尿沉渣計數(shù)板[5] 計算室為正方形邊長9 mm，池深0.125 mm，混勻尿滴入池內計數(shù)規(guī)定區(qū)結果除以5，細胞少時計數(shù)全室結果除以10，即為每微升細胞數(shù)。
牛鮑計數(shù)板法 將混勻尿充池，計數(shù)9大格細胞數(shù)×10÷9，即為每微升細胞數(shù)。
FR定量板法[6] 混勻尿10 ml于Biostd離心管內，經(jīng)1 500 r/min 離心5 min，傾去上清余0.25 ml沉渣即留在管底縮小區(qū)內，將沉渣混勻滴入FR板內，計數(shù)10大格即得每微升細胞數(shù)。每板10人份一次性使用，保濕，細胞形態(tài)及分布穩(wěn)定。
三、干化學法
將試劑包含在纖維素中作為反應部分粘附在塑料支持片上干燥而成試紙帶，以鏡檢為標準半定量檢測尿中成分。Schumann認為干化學檢查陰性再鏡檢是浪費時間，周仲玲等認為即使干化學檢查全部陰性，而滴蟲、霉菌及病理性結晶等仍需鏡檢。1996年的推薦方法中確定，干化學檢驗只有符合下列四項要求才可以不作鏡檢:尿白細胞結果為陰性；紅細胞結果陰性；尿蛋白為陰性；亞硝酸鹽為陰性。來源于腎科標本不適合干化學篩選，應一律顯微鏡檢查。叢玉隆等6 349例研究結果:干化學分析結果同時存在紅細胞陰性、白細胞陰性、蛋白質陰性時免于鏡檢對病理性管型檢出率影響不大。
四、尿沉渣自動化影像分析
尿沉渣分析自動化的研究由來己久，但難度較大。直到1986年才由美國國際遙控攝像系統(tǒng)有限公司研制生產(chǎn)了世界上第一臺高速攝像機式的尿沉渣自動分析儀。
目前，尿沉渣分析儀主要有兩大類:基于尿沉渣鏡檢影像分析原理；基于尿沉渣流式細胞術和電阻抗檢測原理。
影像式尿沉渣(或稱“工作站”)其檢測原理與人工顯微鏡檢查原理基本相似，都是直觀地觀察有形成分的形態(tài)，但它須經(jīng)過嚴格的定時、定速離心，而后留取定量的尿沉渣，由配套動力裝置將其轉移至顯微鏡載物臺上刻有標尺的流動樣品池內，通過頻閃光源燈、相聚光鏡、彩色攝像機等，在電腦顯示屏上得到清晰的尿沉渣畫面，再由操作者在屏幕上統(tǒng)計出各種有形成分的數(shù)目，由計算機自動換算成每微升單位的數(shù)據(jù)。同普通光學顯微鏡方法相比，其分析標準定量、視野清晰、速度快捷、準確度高。
1983年，美國國際遙控影像系統(tǒng)有限公司（International Remote imaging systems Co,Ltd）研制生產(chǎn)了世界上第一臺“Yollow IRlS”高速攝影機式的尿沉渣自動分析儀，簡稱Y—1尿自動分析儀。這種儀器是將標本的粒子影像展示在計算機的屏幕上，由檢驗人員加以鑒別。
1996年，德國寶靈曼推出圖像式尿沉渣自動分析儀，采用兩個快速|檢驗地帶網(wǎng)|移動的CCD攝像頭對樣品計數(shù)池進行掃描。
1997年，美國戴西斯公司（DiaSys R/S Corporation）推出流動池式尿沉渣定量分析工作站，1999年引入中國，由于解決了尿沉渣鏡檢中精確定量問題，該產(chǎn)品引起了國內檢驗界的關注。
五、尿沉渣自動化流式分析
1995年，Sysmex研制出經(jīng)典機型 UF-100，被譽為"尿分析史的革命"。UF-100每小時可分析約100個樣本，大大提高了提高了實驗室的自動化水平和工作效率。
在UF-100全自動尿沉渣分析檢測分析中，應用流式細胞和電阻抗分析的原理:尿液中細胞等經(jīng)熒光色素染色后，在鞘流液的作用下，形成單個、縱列細胞流，通過氬激光檢測區(qū)，儀器檢測熒光、散射光和電阻抗的變化；當儀器在捕獲了熒光強度Fl、前向熒光脈沖寬度Flw、前向散射光強度Fsc、前向散射光脈沖寬度Fscw、電阻抗信號后，綜合識別和計算得到了相應細胞的大小、長度、體積和染色質長度等資料，并做出紅細胞、白細胞、細菌、管型等的散射圖及定量報告。
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