血球試劑小編為您介紹下血細(xì)胞分析儀檢測(cè)方法之多角度偏振光激光散射技術(shù)。
美國(guó)雅培公司(ABBOTT)推出的血細(xì)胞分析儀,在白細(xì)胞分類中采用獨(dú)特的多角度偏振光散射(MAPSS)技術(shù),其所生產(chǎn)的血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀從CELL-DYN 3000,3200,3500,3700,4000,以及Sapphire(藍(lán)寶石),在白細(xì)胞分類上均采用了MAPSS技術(shù)。該技術(shù)基本原理是細(xì)胞在激光束的照射下,在多個(gè)角度都產(chǎn)生散射光,儀器在四個(gè)角度的四個(gè)檢測(cè)器將接收到的相應(yīng)的散射光信號(hào),然后經(jīng)過微處理器分析處理,將各類細(xì)胞安置在散點(diǎn)圖上的相應(yīng)位置,并計(jì)算出白細(xì)胞分類結(jié)果。
多角度偏振光散射白細(xì)胞分類技術(shù)(Multi—Angle Polatised Scatter Separation of white cell,MAPSS)其原理是一定體積的全血標(biāo)本用鞘流液按適當(dāng)比例稀釋。其白細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)近似于自然狀態(tài),因嗜堿性粒細(xì)胞顆粒具有吸濕的特性,所以嗜堿性粒細(xì)胞的結(jié)構(gòu)有輕微改變。紅細(xì)胞內(nèi)部的滲透壓高于鞘液滲透壓而發(fā)生改變,紅細(xì)胞內(nèi)的血紅蛋白從細(xì)胞內(nèi)游離出來,而鞘液內(nèi)的水分進(jìn)入紅細(xì)胞中,細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)仍然完整,但此時(shí)的紅細(xì)胞折光指數(shù)與鞘液的相同,故紅細(xì)胞不干擾白細(xì)胞檢測(cè)。在鞘流系統(tǒng)的作用下,樣本被集中為一個(gè)直徑30μm的小股液流,該液流將稀釋的血細(xì)胞單個(gè)排列,然后通過激光束,激光照射于細(xì)胞上,在各個(gè)方向都有其散射光出現(xiàn)。
1) 0°為前向角散射光,可粗略地測(cè)定細(xì)胞大小;
2) 10°為狹角散射光,可測(cè)細(xì)胞結(jié)構(gòu)及其復(fù)雜性的相對(duì)特征;
3) 90°垂直光散射,主要對(duì)細(xì)胞內(nèi)部顆粒和細(xì)胞成分進(jìn)行測(cè)量。
4) 90°為消偏振光散射,基于顆??梢詫⒋怪苯嵌鹊钠窦す庀竦奶匦裕瑢⑹人峒?xì)胞從中性粒細(xì)胞和其它細(xì)胞中分離出來。
5) 這四個(gè)角度同時(shí)對(duì)單個(gè)白細(xì)胞進(jìn)行測(cè)量和分析后,即可將白細(xì)胞劃分為嗜酸性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞5種。ABBOTT的五分類法定量很有意思,不用傳統(tǒng)的體積定量,而是采用數(shù)量定量,每次計(jì)數(shù)時(shí)完成10000個(gè)細(xì)胞測(cè)定即停止。
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