生化清洗液小編為你介紹一下常見發(fā)光免疫分析技術(shù)的代表儀器中的電化學(xué)發(fā)光
電化學(xué)發(fā)光的原理是對(duì)電極施加一定的電壓進(jìn)行電化學(xué)反應(yīng)，反應(yīng)的產(chǎn)物之間或與體系中某種組分發(fā)生化學(xué)發(fā)光，用普通光學(xué)手段測(cè)髓發(fā)光光譜軍Ⅱ強(qiáng)度從麗對(duì)物質(zhì)進(jìn)行衡量分析的一種方法。與化學(xué)發(fā)光有所不同，其差異在予氧化反應(yīng)是通過(guò)電極上的電化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的，而不是氧化劑或發(fā)光劑自身內(nèi)氧化產(chǎn)生，其標(biāo)記物為三聯(lián)吡啶釕及其衍生物Ru(bpy)3 2 ，并以三丙胺(TPA)為還原荊。如圖1所示，Ru(bpy)32十穰TPA分剃在弼投裊囂氧化成Ru(bpy)3 3 搬TPA的陽(yáng)離子自由基IPA ，IPA 迅速脫去一個(gè)質(zhì)子形成TPA自由基，TPA具有強(qiáng)的還原性，從而把Ru(bpy)3 3 還原為激發(fā)態(tài)的Ru(bpy)3 2 ，后者發(fā)射一個(gè)620 nm的光子回到基態(tài)再參與下一次電化學(xué)發(fā)光。必需0.01毫秒就可發(fā)出穩(wěn)定的光，每毫秒幾十萬(wàn)次的循環(huán)電化學(xué)發(fā)光，大大提高了分析的靈敏度。另外，通過(guò)電極反應(yīng)在線制備了不穩(wěn)定的發(fā)光劑Ru(bpy)32 緲程TPA，避免了直接使用Ru(bpy)3 2 對(duì)分析測(cè)試的影響。
電純學(xué)發(fā)光的主要特點(diǎn)是發(fā)光過(guò)程中的標(biāo)記物基本不被消耗，麗反應(yīng)體系中其他成分充分過(guò)量，因此發(fā)光倍號(hào)強(qiáng)而穩(wěn)定，且發(fā)光時(shí)間較長(zhǎng)。其缺點(diǎn)為測(cè)量方式復(fù)雜、儀器成本及維護(hù)費(fèi)用高；同時(shí)環(huán)境及樣品中同類元素也存在較弱的本底干擾。反復(fù)使用的流動(dòng)池可能導(dǎo)致交叉污染；而沖洗或進(jìn)樣中產(chǎn)生的氣泡也會(huì)干擾測(cè)定；同時(shí)繁瑣冗長(zhǎng)的沖洗過(guò)程也會(huì)成為提高檢測(cè)效率的瓶頸。另外使用磁性或非磁性微粒時(shí)，強(qiáng)烈的散射吸收作用也會(huì)降低靈敏度。
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