血常規(guī)檢驗(yàn)是診斷各種血液病的主要依據(jù)，影響血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果的因素很多，要想取得準(zhǔn)確的檢驗(yàn)數(shù)據(jù)，就要在實(shí)驗(yàn)的每一個(gè)步驟中都嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行。本文列舉幾點(diǎn)血液細(xì)胞檢驗(yàn)中的注意事項(xiàng)。
標(biāo)本的采集
為了取得準(zhǔn)確、可靠的檢驗(yàn)結(jié)果，必須取得高質(zhì)量的標(biāo)本。高質(zhì)量的標(biāo)本是高質(zhì)量檢驗(yàn)的第一步。保證血液標(biāo)本中各項(xiàng)細(xì)胞的形態(tài)完整是血常規(guī)高質(zhì)量標(biāo)本的最基本的要求。血液細(xì)胞檢驗(yàn)標(biāo)本的制備分為采集和抗凝2個(gè)步驟。
1.標(biāo)本的采集
（1）采血部位的選擇
最常用的途徑是靜脈采血和末梢毛細(xì)血管采血。各類文獻(xiàn)均表明，靜脈血血樣是最可靠的標(biāo)本，手指血是末梢毛細(xì)血管血樣中與靜脈血差異最小且較為穩(wěn)定的血樣。有研究表明，與靜脈血相比，手指血的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性仍然較差：白細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯升高而血小板計(jì)數(shù)明顯減低。因此，絕大多數(shù)專家建議：血常規(guī)檢驗(yàn)特別是應(yīng)用血液分析儀時(shí)，應(yīng)使用靜脈血。
（2）采集靜脈血
要注意不能在患者輸液滯留針處或輸液靜脈同側(cè)血管采集標(biāo)本，以免造成血液稀釋；止血帶壓迫時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(<1 min )，以免瘀血和血液濃縮。
2.標(biāo)本的抗凝
用于血常規(guī)檢驗(yàn)的血樣必須經(jīng)抗凝劑抗凝處理，在目前的眾多抗凝劑中，EDTA鹽(EDTA-Na2,EDTA-K2,EDTA-K3)是對(duì)白細(xì)胞形態(tài)和血小板影響相對(duì)較小的抗凝劑，最適合用于血常規(guī)檢驗(yàn)。除采血因素的影響(生理性因素、采血部位等)外，多數(shù)情況下，血樣的質(zhì)量取決于血液和抗凝劑的比例。血液比例過(guò)高時(shí)，由于抗凝劑相對(duì)不足，血漿中出現(xiàn)微凝血塊的可能性增加，在用于血細(xì)胞分析儀時(shí)，微凝血塊可能阻塞儀器，同時(shí)影響一些檢驗(yàn)指標(biāo)。血液比例過(guò)低，抗凝劑相對(duì)過(guò)剩，對(duì)檢驗(yàn)指標(biāo)會(huì)造成嚴(yán)重影響。血液經(jīng)EDTA抗凝后，白細(xì)胞的形態(tài)會(huì)發(fā)生改變，這種改變和時(shí)間及EDTA濃度有關(guān)。EDTA的最佳濃度(與血液比)為1.5 mg/ml,如果血樣少，EDTA的濃度達(dá)到2.5 mg/ml，中性粒細(xì)胞腫脹、分葉消失，血小板腫脹、崩解、產(chǎn)生正常血小板大小的碎片，這些改變都會(huì)使血常規(guī)檢驗(yàn)和血細(xì)胞計(jì)數(shù)得出錯(cuò)誤結(jié)果。這一點(diǎn)在用自動(dòng)血細(xì)胞分析儀時(shí)尤為重要。
儀器的校準(zhǔn)
血細(xì)胞分析儀只能用儀器配套的校準(zhǔn)物對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)，一些血細(xì)胞分析儀無(wú)配套的校準(zhǔn)物，這種情況下，實(shí)驗(yàn)室只能使用經(jīng)二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)血液分析儀或規(guī)范操作的監(jiān)測(cè)系統(tǒng)定值的新鮮血作為校準(zhǔn)物對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)。有數(shù)臺(tái)的分析儀的需先對(duì)其中一臺(tái)進(jìn)行校準(zhǔn)后，在用新鮮的全血對(duì)其他臺(tái)進(jìn)行校準(zhǔn)。至少半年校準(zhǔn)一次。實(shí)驗(yàn)室有數(shù)臺(tái)血細(xì)胞分析儀的，為了保證不同儀器間檢測(cè)結(jié)果的可比性和準(zhǔn)確性，需對(duì)每臺(tái)儀器進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控、儀器校準(zhǔn)等，以保證檢測(cè)質(zhì)量的措施，此外，還需定期用新鮮血標(biāo)本在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不同型號(hào)的儀器上進(jìn)行結(jié)果比對(duì)。
標(biāo)本的儲(chǔ)存
抗凝全血標(biāo)本應(yīng)在室溫條件下(一般血液分析儀要求的室溫條件是8 ℃～25 ℃)。如前文所述，抗凝劑因時(shí)間和濃度的不同，會(huì)造成對(duì)血細(xì)胞形態(tài)的影響。有研究表明，用EDTA抗凝靜脈血標(biāo)本，8h內(nèi)(室溫)檢測(cè)，可以得到最佳的檢測(cè)結(jié)果。白細(xì)胞2h后粒細(xì)胞形態(tài)可出現(xiàn)變化；如果不能在有效時(shí)間內(nèi)及時(shí)用儀器進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，須盡快推制血涂片，以便必要時(shí)用顯微鏡對(duì)血涂片進(jìn)行復(fù)查。雖然2℃～8℃可延長(zhǎng)保存時(shí)間，但血小板的體積會(huì)逐漸發(fā)生改變EDTA鹽與血液混合后血小板形態(tài)逐漸變?yōu)榍蛐?，體積由所增大，又研究表明可增大20%左右，1h后才趨于穩(wěn)定，1h～6h后的變化小于3%，故使用血液分析儀對(duì)紅細(xì)胞比容檢測(cè)時(shí)應(yīng)在采血1h后進(jìn)行。如果不需要血小板和白細(xì)胞分類的準(zhǔn)確數(shù)據(jù)，則標(biāo)本可以在2 ℃～8 ℃的條件下存入至24h。
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